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基因打靶技術(shù)原理、試驗(yàn)流程和特點(diǎn)

2017-7-18 閱讀(398)

基因打靶技術(shù)原理、試驗(yàn)流程和特點(diǎn)

基因打靶技術(shù)是一種定向改變生物活體遺傳信息的實(shí)驗(yàn)手段,它的產(chǎn)生和發(fā)展建立在胚胎干(ES) 細(xì)胞技術(shù)和同源重組技術(shù)成就的基礎(chǔ)之上,并促進(jìn)了相關(guān)技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展?;虼虬屑夹g(shù)將廣泛應(yīng)用于基因功能研究、人類(lèi)疾病動(dòng)物模型的研制以及經(jīng)濟(jì)動(dòng)物遺傳物質(zhì)的改良等方面。 
1 .原理 
首先獲得ES 細(xì)胞系,利用同源重組技術(shù)獲得帶有研究者預(yù)先設(shè)計(jì)突變的中靶ES 細(xì)胞。通過(guò)顯微注射或者胚胎融合的方法將經(jīng)過(guò)遺傳修飾的ES 細(xì)胞引入受體胚胎內(nèi)。經(jīng)過(guò)遺傳修飾的ES 細(xì)胞仍然保持分化的性,可以發(fā)育為嵌合體動(dòng)物的細(xì)胞,使得經(jīng)過(guò)修飾的遺傳信息經(jīng)系遺傳。獲得的帶有特定修飾的突變動(dòng)物提供研究者一個(gè)特殊的研究體系,使他們可以在生物活體中研究特定基因的功能。目前,在ES 細(xì)胞進(jìn)行同源重組己經(jīng)成為一種對(duì)小鼠染色體組上任意位點(diǎn)進(jìn)行遺傳修飾的常規(guī)技術(shù)。通過(guò)基因打靶獲得的突變小鼠己經(jīng)超過(guò)千種( 相關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)參見(jiàn)文獻(xiàn)) ,并正以每年數(shù)百種的速度增加。通過(guò)對(duì)這些突變小鼠的表型分析,許多與人類(lèi)疾病相關(guān)的新基因的功能已得到闡明,并直接導(dǎo)致了現(xiàn)代生物學(xué)研究各個(gè)領(lǐng)域中許多突破性的進(jìn)展。 
2 .實(shí)驗(yàn)流程 
3 .特點(diǎn) 
基因打靶技術(shù)是一種定向改變生物活體遺傳信息的實(shí)驗(yàn)手段。通過(guò)對(duì)生物活體遺傳信息的定向修飾包括基因滅活、點(diǎn)突變引人、缺失突變、外源基因定位引入、染色體組大片段刪除等,并使修飾后的遺傳信息在生物活體內(nèi)遺傳,表達(dá)突變的性狀,從而可以研究基因功能等生命科學(xué)的重大問(wèn)題,以及提供相關(guān)的疾病治療、新藥篩選評(píng)價(jià)模型等?;虼虬屑夹g(shù)的發(fā)展己使得對(duì)特定細(xì)胞、組織或者動(dòng)物個(gè)體的遺傳物質(zhì)進(jìn)行修飾成為可能。 
4 .應(yīng)用 
基因打靶技術(shù)在基因功能研究中的應(yīng)用、應(yīng)用基因打靶技術(shù)研制人類(lèi)疾病動(dòng)物模型、應(yīng)用基因打靶技術(shù)改良動(dòng)物品系和研制動(dòng)物反應(yīng)器等。 



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