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技術(shù)文章

小鼠角膜成纖維細(xì)胞操作說(shuō)明

閱讀:120          發(fā)布時(shí)間:2019-7-12

                     小鼠角膜成纖維細(xì)胞操作說(shuō)明

上海邦景生物科技有限公司系集研發(fā),生產(chǎn),銷(xiāo)售為一體的*.公司擁有:分子生物學(xué),醫(yī)學(xué),藥學(xué),化學(xué)等方面的多名專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員.是數(shù)家國(guó)外著名生命科學(xué)類(lèi)公司在中國(guó)的總進(jìn)口商及總經(jīng)銷(xiāo)商.公司自成立以來(lái),秉承"全心全意服務(wù)于科研工作者"的企業(yè)理念,立足生物科技領(lǐng)域,運(yùn)用生物技術(shù)和高新科研試劑,發(fā)展現(xiàn)代生物科技,為各類(lèi)大中小醫(yī)院及其它醫(yī)療機(jī)構(gòu),高等院校,科研院所,企事業(yè)單位提供的產(chǎn)品,服務(wù)生物科技領(lǐng)域的科學(xué)研究人員.小編為你介紹  小鼠角膜成纖維細(xì)胞操作說(shuō)明。

小鼠角膜成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基的基本特性:

(1)原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。

(2)每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù):>5×105 cells/1ml。

(3)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

(4)代數(shù):2-4代。

(5)用途:只可用于科研

小鼠角膜成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基操作步驟:

1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀(guān)察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀(guān)察貼壁生長(zhǎng)情況。

2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

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