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                    驢源性成分（Don）核酸檢測試劑盒操作流程

秋風乍起，落葉歸根;靜水東流，孤夜月明。秋天給人一種悲涼寂寥的感覺。有的人在這樣的季節(jié)里會傷春悲秋，會在這樣的季度里感嘆生命的無常。接下來介紹  驢源性成分（Don）核酸檢測試劑盒操作流程

技術(shù)特點：

1準確可靠，臨床雙盲對照試驗＞1000例，結(jié)果與金標準測序法比對，結(jié)果一致性大于99%。

2高靈敏：可檢測低至10ng的人基因組DNA。

3快速：整個檢測流程只需3小時。

4簡便：試劑盒提供預混好的試劑，使體系配置操作簡便。

5防污染

6高特異性：雙重特異性組成，保證檢測結(jié)果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結(jié)合必需*配對，才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對，在延伸中產(chǎn)生熒光

以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。